新型冠狀病毒核酸檢測的標(biāo)準(zhǔn)主要包括樣本采集、核酸提取、擴(kuò)增檢測、結(jié)果判讀和質(zhì)量控制等環(huán)節(jié),具體操作需嚴(yán)格遵循國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布的新型冠狀病毒肺炎防控方案及相關(guān)技術(shù)指南。
樣本采集是檢測流程的第一步,通常使用鼻咽拭子或口咽拭子,在特定情況下也可采集痰液、肺泡灌洗液或血液等樣本。采集后的樣本需置于專用的病毒保存液中,并在規(guī)定溫度下及時運(yùn)送至具備資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室收到樣本后,首先進(jìn)行滅活處理以確保生物安全,隨后使用商業(yè)化核酸提取試劑盒或自動化提取儀進(jìn)行病毒RNA的提取,這一步驟旨在去除樣本中的抑制物并純化核酸,為后續(xù)檢測提供模板。核酸提取完成后,進(jìn)入核心的擴(kuò)增檢測階段,目前廣泛采用的是實(shí)時熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)。該技術(shù)需要特定的引物和探針,這些試劑通常針對病毒基因組中高度保守的區(qū)域設(shè)計(jì),例如開放閱讀框1ab和核衣殼蛋白基因區(qū)域,以確保檢測的特異性。實(shí)驗(yàn)室在擴(kuò)增過程中會設(shè)置陽性對照、陰性對照和空白對照,用以監(jiān)控整個實(shí)驗(yàn)過程的有效性,防止因污染或試劑失效導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果。擴(kuò)增程序結(jié)束后,儀器會根據(jù)熒光信號增長曲線自動判讀結(jié)果,檢測樣本的循環(huán)閾值若低于預(yù)設(shè)的陽性判斷值,則判定為陽性;若無明顯擴(kuò)增曲線,則判定為陰性;若循環(huán)閾值處于灰區(qū),則需重復(fù)檢測或采用不同廠家試劑進(jìn)行復(fù)核。為確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠,實(shí)驗(yàn)室必須建立并運(yùn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,這包括對檢測人員的持續(xù)培訓(xùn)、對儀器設(shè)備的定期校準(zhǔn)與維護(hù)、對試劑耗材的驗(yàn)收核查,以及定期參加國家或省級臨床檢驗(yàn)中心組織的能力驗(yàn)證或室間質(zhì)評活動。整個檢測過程,從樣本接收到報(bào)告發(fā)出,都應(yīng)在生物安全二級實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下操作,并做好詳盡的過程記錄,確保檢測活動可追溯。
進(jìn)行核酸檢測前后,應(yīng)注意個人防護(hù),檢測前兩小時內(nèi)避免進(jìn)食飲水,以免引起惡心反應(yīng)影響采樣。檢測后應(yīng)佩戴好口罩立即離開,避免在采集點(diǎn)周圍逗留或交談。日常生活中,仍需堅(jiān)持佩戴口罩、保持社交距離、勤洗手、多通風(fēng)等良好衛(wèi)生習(xí)慣,即使檢測結(jié)果為陰性,在疫情流行期間或存在暴露風(fēng)險(xiǎn)后,也應(yīng)根據(jù)防疫要求配合進(jìn)行多次檢測或健康監(jiān)測。
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